遺伝子DNA抽出

DNA抽出(GenEluteTM Mammalian Genomic DNA Miniprep kitを用いた例): Contributor A. Onami

  1. サンプル（細胞、組織、血液、白血球など）をエッペンチューブに入れ，Resuspension solution を200μℓ 加える．
  2. Protease K を 20μℓ加える．
  3. Lysis solution を 200μℓ加える．
  4. よくvortexを行った後，70℃で10分 処理する．

＊55℃ 2時間もしくは，36℃ オーバーナイトでも可

  1. 上記の処理中にカラムチューブを準備し，カラムPreparationを 500μℓ加え，10,000×gで 1分遠心し，下の液を捨てる．
  2. 70℃ 10分 処理後のサンプルにEthanol を200μℓ 加え，よくvortexを行った後，サンプルをすべてカラムチューブに移す．
  3. カラムチューブを10,000×gで1分遠心した後，カラムを新しいエッペンチューブに移す．
  4. カラムにWash solutionを500μℓ加え，10,000×g で1分遠心する．
  5. 下の液を捨て再びWash solutionを500μℓ加え，10,000×gで 1分遠心する．
  6. 下の液を捨てそのまま10,000×g で3分 遠心する．
  7. 下の液を捨てElution buffer 100μℓをカラムの中心に加え，5分静置した後 10,000×gで1分遠心する．

［備考］

【-20℃で保存試薬】

Protease K

【常温で保存】

Resuspension solution

Lysis solution

Ethanol

Wash solution

Elution buffer